不能干,膜和蛋白性质都会受影响的。楼上两位的做法虽然也的确可以出结果,但是这种结果就比较不可靠了PVDF膜最怕干,个人认为一旦干了,果断放弃。长期保存,用TBS,放在完全密封的盒子里,比如locklock。
≥△≤ 膜干了以后可以通过浸泡甲醇恢复,转膜过程发生干膜也可以这样,但是会对结果有一定影响。就像楼上说的,孵育过抗体再晾干就不能strip了,一般stripping 试剂盒说PVDF 膜可以用氨基黑10B染色,不影响后续的Western检测。txwuyan (2014-1-25 16:04:57) 今天我又转了一次膜(PVDF),用丽春红染色后有条带出现,但是之后条带又慢慢淡了下来,特
pvdf膜是一种常用的过滤膜,干了会使膜通量下降,影响出水效率。所以尽量不要让pvdf膜处于干的状态,在使用和保存时要时刻保持它的湿润。但总会出现特殊的情况,比如存储时忘了加转完膜后因为膜太大盒子太小,我就剪了一下膜,把没有样品的半边剪掉了。怕膜上沾上杂质,特别小心地剪,结果就是动作太慢,膜干啦。然后泡了一会儿甲醇,等它恢复
相当与再封闭了一下,只要手没有在上面来回有意识的蹭,你直接向下做把,一般的膜与蛋白的结合是很牢固的. 如果pvdf膜在显色前干了,会不会影响显色,结果就显不了不能干,膜和蛋白性质都会受影响的。楼上两位的做法虽然也的确可以出结果,但是这种结果就比较不可靠了。这样做出来的DATA估计像样的杂志是不会接受的(当然如果他们知道的话)
Western blot有多种类型的膜可以用,不是所有类型的膜都适合做Stripping。PVDF膜是最适合做Stripping的膜类型,蛋白样本的丢失量最小。不同的显影剂,对Strippin温暖小手发布于2012-04-25 12:52IP北京亲·~最后结果怎么样回复点赞收藏更多