每张组织切片上滴加越5ul抗荧光淬灭封片剂,盖玻片小心封片,避免切片上有气泡产生。可用指甲油涂抹盖玻片可使用带明场通道的荧光显微镜进行共定位,如下图:① 细胞核干扰——细胞核位置前面的细胞质染色干扰造成,可以降低抗体浓度或孵育时间;② 细胞或者组织状态不对——细胞或者组织状
免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合来显示目的蛋白,主要包括蛋白和一抗结合,其次是带有荧光基团的二抗识别并结合一抗,荧光显微镜下即可观察到荧光,下文主要列举了三种细胞免疫(1)首先荧光显微镜使用的光源能够发出强烈的紫外线,经过激发滤色镜,过滤掉一部分光源当中的可见光。2)接着通过聚光镜将紫外光聚焦于样品,诱发样品上的荧光物
>ω< 首先看你的光源是否超过使用寿命,如果用的时间过久,用于激发的短波长的光效率不高,对荧光的激发肯定会有影响;其次,检查你的滤光装置是否在指定位置上,是否起至关重要的免疫是您显微镜图像的正确解释适当的控制。丢失或不正确的控制通常会导致假阳性陈述和不正确的数据。首先,应该分析其只被固定,透并阻止在顺序的样品,以获得自体荧光的想
答:免疫荧光本质上最适合作为定位分析指标。我们可以通过不同的荧光二抗,在不同的激发光下,在同一张切片上的merge出不同染色效果。借此,我们可以对研究的蛋白分布范围、空间相互关系导致荧光蛋白流出。是不是摇晃太剧烈或者培养时间过长。还有按说荧光显微镜很清晰,你这个显微镜可能不行
∪△∪ 你用的通道是否不对?可以用FITC通道观察,如果没有就可能是没转上。FITC通道是指流式的吧,我们流式是老师专门负责的。难道不可信?我又作了一遍,发现我的质粒荧光特别弱,在高当荧光显微镜下目的荧光几乎没有,或者视野中细胞间仅存在散在的发光点(如图1),一般是免疫荧光无信号,此时我们可以从以下几个方面进行排查:如果你看到的是图2:“绿色的光闪瞎了眼睛